¿Por que RT-LAMP es equiparable al PCR?
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) ha sido la técnica más utilizada para la detección de ácidos nucleicos en laboratorios de todo el mundo durante varias décadas. Sin embargo, la técnica PCR requiere una maquinaria especializada, personal capacitado y tiempo para obtener resultados. En los últimos años, ha surgido una nueva técnica de amplificación de ácidos nucleicos conocida como amplificación isotérmica mediada por bucle de transcripción inversa (RT-LAMP) que se está utilizando cada vez más en aplicaciones de diagnóstico en tiempo real. En este artículo, se discutirá cómo el RT-LAMP es comparable al PCR en términos de usabilidad, precisión y tiempo, y por qué los laboratorios deberían considerar el uso de productos RT-LAMP para sus necesidades de diagnóstico.
Usabilidad
El RT-LAMP es una técnica de amplificación isotérmica que no requiere ciclos de temperatura como la PCR. Esto significa que el RT-LAMP puede ser utilizado en equipos simples y portátiles, que no requieren de una fuente de calor especializada para llevar a cabo la amplificación isotérmica. Además, el RT-LAMP es fácil de utilizar en comparación con la técnica de PCR, lo que hace que sea más accesible para los laboratorios que no tienen experiencia en técnicas moleculares.
Los kits de RT-LAMP también son fáciles de usar, ya que contienen todos los reactivos necesarios para llevar a cabo la amplificación isotérmica y la detección en un solo paso. Esto significa que no se requiere una manipulación compleja de los reactivos y que la preparación del kit se realiza de forma rápida y sencilla. Por lo tanto, el RT-LAMP es una técnica de diagnóstico molecular que es fácil de implementar en laboratorios que no tienen experiencia previa en técnicas moleculares.
Precisión
El RT-LAMP es una técnica de amplificación isotérmica altamente específica y sensible que puede detectar bajos niveles de ácidos nucleicos. Esta técnica utiliza cebadores específicos para amplificar regiones específicas del ácido nucleico diana. Estos cebadores se diseñan utilizando secuencias de ácido nucleico específicas del patógeno o la muestra que se está analizando.
El diseño específico de los cebadores y la amplificación isotérmica permiten una alta especificidad de la técnica RT-LAMP, ya que los cebadores solo amplificarán la región diana del ácido nucleico. Además, el RT-LAMP es altamente sensible, lo que significa que puede detectar pequeñas cantidades de ácido nucleico diana. La técnica de RT-LAMP puede detectar tan poco como una sola copia de ácido nucleico diana en la muestra.
El RT-LAMP también tiene menos posibilidades de contaminación cruzada que la técnica de PCR. Debido a que la técnica de RT-LAMP no requiere ciclos de temperatura, el riesgo de contaminación cruzada debido a la apertura de los tubos de reacción se minimiza. En general, el RT-LAMP es una técnica de diagnóstico molecular altamente precisa que puede detectar bajos niveles de ácido nucleico diana con alta especificidad.
Tiempo
El RT-LAMP es una técnica de amplificación isotérmica que puede llevar a cabo la detección en un solo paso, lo que significa que la amplificación y la detección ocurren al mismo tiempo. En comparación con la técnica de PCR, el RT-LAMP tiene un tiempo de procesamiento más rápido. El tiempo necesario para llevar a cabo la amplificación y detección mediante RT-LAMP puede variar dependiendo del equipo utilizado y el tipo de muestra, pero en general, el RT-LAMP puede obtener resultados en tan solo 30 minutos.
Además, la técnica RT-LAMP es altamente adaptable a diferentes tipos de muestras. A diferencia de la técnica de PCR, que a menudo requiere una preparación previa de la muestra, el RT-LAMP puede llevarse a cabo en una amplia variedad de muestras, incluyendo muestras clínicas, ambientales y de alimentos, sin la necesidad de una preparación previa compleja.